Судебно-медицинская генетическая экспертиза

25.10.2018 Выкл. Автор admin

Критерии оценки судебно-медицинской молекулярно-генетической экспертизы

Критерии оценки судебно-медицинской молекулярно-генетической экспертизы / Смоляницкий А.Г., Попов В.Л., Заславский Г.И. // Мат. VI Всеросс. съезда судебных медиков. — М.-Тюмень, 2005.

библиографическое описание:
Критерии оценки судебно-медицинской молекулярно-генетической экспертизы / Смоляницкий А.Г., Попов В.Л., Заславский Г.И. // Мат. VI Всеросс. съезда судебных медиков. — М.-Тюмень, 2005.

код для вставки на форум:

Вопрос оценки любой судебно-медицинской экспертизы последовательно возникает перед правоохранительными структурами (следователем, дознавателем), судебными инстанциями (судьей, представителями защиты и обвинения). От его объективного решения зависит та роль в системе доказательств, которая будет отведена экспертизе. Для судебных экспертиз, базирующихся на традиционных, устоявшихся областях судебно-медицинских знаний сложились стабильные критерии объективной оценки суммы проведенных исследований, формы представления результатов, соответствия сделанных выводов комплексу установленных характеристик. Молекулярно-генетическая экспертиза является относительно новой, развивающейся областью судебной медицины, поэтому стройная система ее анализа требует для своего формирования введения ряда критериев, вносящих объективные параметры оценки.

Новая наукоемкая отрасль знаний, каковой является молекулярно-генетическая идентификация личности, развивается чрезвычайно интенсивно. Объективная закономерность такого процесса очевидна:

  • · Наличие молекул ДНК во всех клетках человека дает возможность исследовать большинство биологических следов-улик, которые обнаружены на месте преступления;
  • · Высокая устойчивость структуры исследуемой молекулы ДНК к воздействию физико-химических факторов окружающей среды (в научном мире широко известен случай анализа ДНК египетской мумии, пролежавшей в саркофаге более 4000 лет) [1, 2];
  • · Возможность результативного генотипирования сильно деградированной ДНК, которая часто сопутствует биологическим объектам, подвергшимся гнилостным изменениям;
  • · Хорошо развитая группа методов позволяющая провести генетический анализ чрезвычайно низкого количества биоматериала (единичный волос, окурок сигареты, почтовая марка со следами слюны, отдельные сперматозоиды и другие) в сжатые сроки (при необходимости экспертиза может быть проведена за 48 часов) с конкретным вероятностным выводом [3].

Поэтому, в большинстве Западных стран принята законодательная база, которая не допускает судебного производства как по гражданским, так и по уголовным делам без данных молекулярно-генетического анализа.

Постепенное развитие отрасли происходит и в России. Уже к началу 1998 года в Российской Федерации только в системе Минздрава было зарегистрировано 20 специализированных молекулярно-генетических подразделений. Весной 1998 года на базе Ленинградского областного БСМЭ состоялось Первое Всероссийское совещание по судебно-медицинской генетике, давшее возможность скоординировать усилия по взаимодействию территориальных лабораторий. Все большее число судебных разбирательств по гражданским делам установления оспариваемого отцовства (спорного материнства, подмены детей, установления степени родства) проводятся с учетом данных молекулярно-генетических исследований. По уголовным преступлениям процент экспертиз выполненных с применением генетического анализа также неукоснительно возрастает.

Таким образом, на сегодняшний день, можно говорить о судебно-генетическая службе, руководство которой осуществляет Российский Центр СМЭ МЗ и СР РФ. Несмотря на отсутствие ряда регламентирующих нормативных документов, сделан ряд шагов, направленных на унификацию молекулярно-генетической экспертизы. Осуществляется контроль со стороны Российского Центра СМЭ МЗ и СР РФ за деятельностью региональных подразделений.

Однако, перечисленные выше факторы, безусловно способствуя повышению качества и весомости, не снимают необходимости иметь комплекс критериев оценки молекулярно-генетической экспертизы.

Основные из них, на наш взгляд, могут быть тезисно сформулированы следующим образом.

  • § Примененные при выполнении молекулярно-генетической экспертизы системы анализа должны быть стандартизованы и приняты в мировом сообществе судебных генетиков. Так как в России выбора и официального утверждения набора систем анализа пока не произошло, то наиболее целесообразно использовать американскую модель CODIS (FBI, USA, 13 STR loci), европейскую GSM (10 loci) или их сочетание.
  • § Способ представления результатов молекулярно-генетического исследования должен отражать не только количество и характеристики использованных систем генетического анализа, но и подробную таблицу результатов. Выявленные генетические признаки (аллели) приведенные в таблице, должны быть снабжены ссылкой на номенклатурный источник. Разница в обозначении аллелей по различным литературным источникам может привести к сложностям как интерпретации, так и возможного последующего сравнительного анализа результатов.
  • § Для грамотной интерпретации полученных результатов, расчета инкриминирующей вероятности или вероятности родства (как правило, отцовства) необходимо использование принятых в нормативных документах формул и алгоритмов [4, 5]. В ряде сложных случаев (например, в случае смешанных следов биологических материалов) алгоритмы расчетов в регламентирующих документах отсутствуют. В таких случаях, выбор формул должен быть аргументирован и приведена ссылка на литературный источник.
  • § Важной составляющей частью экспертного заключения является иллюстративный материал. Наличие в заключении демонстрационных фотографий (электронных фотографий, ксерокопий и т.д.) с результатами генотипирования регламентировано нормативными документами [6].
  • § При анализе экспертного заключения, необходимо обращать внимание на источник данных по частотам встречаемости генетических признаков. Взяты ли эти данные из региональной статистики, представляют ли они Российскую популяционную базу данных, или эксперт оперирует данными, полученными, например, для популяции белого населения США. Десять лет назад популяционных частот по регионам России было явно недостаточно, так как накопление и анализ таких данных происходил вместе с развитием судебной молекулярно-генетической службы страны. В настоящее время, накоплены и опубликованы популяционно-статистические данные на основе населения Москвы, Новосибирска, Санкт-Петербурга, Волгограда, Северо-Запада России и Российской Федерации в целом [7, 8, 9, 10, 11] по ряду распространенных, принятых в судебно-генетическом сообществе систем анализа. Необходимо отметить особо, что во всех случаях утвердительный ответ дается в вероятностной форме (инкриминирующая вероятность выражается в процентах), поэтому только данные генетических исследований не могут и не должны служить единственным и окончательным фактором доказательства вины подозреваемого. Напротив, весь комплекс доказательств, в том числе выводы молекулярно-генетической экспертизы, должен объективно анализироваться судом.

похожие материалы в каталогах

О некоторых особенностях отбора трупных объектов для генетических исследований / Абдулина Е.В., Зыков В.В., Мальцев А.Е. // Вестник судебной медицины. — Новосибирск, 2018. — №4. — С. 50-54.

Анализ генетических исследований абортивного материала / Абдулина Е.В., Зыков В.В., Мальцев А.Е. // Вестник судебной медицины. — Новосибирск, 2018. — №2. — С. 15-18.

Молекулярно-генетическая экспертиза

ДНК . Установление отцовства, материнства, родства методом исследования ДНК

(см. Контакты , Лицензии )

У нас самые низкие цены на Экспертиза ДНК , потому что мы их выполняем в собственной судебной лаборатории!

Судебно-медицинские молекулярно-генетические экспертизы /экспертиз ДНК/ выполняются с целью установления (или отрицания) факта биологического родства (разрешение вопросов спорного происхождения детей, установление внутри семейных и родословных связей) Инструкция по забору буккального эпителия (слюны ) или для целей идентификации личности. Предметом экспертизы являются следы или иные объекты биологического происхождения от живых лиц и трупов, а также материалы уголовных и гражданских дел, при исследовании которых требуются спец. познания в области судебной медицины, молекулярной биологии и генетики. При этом лицензирование судебно-медицинских экспертиз (генетическая) является обязательным требованием : ПОСТАНОВЛЕНИЕ ПРАВИТЕЛЬСТВА РФ от 22 января 2007 г. N 30 «ОБ УТВЕРЖДЕНИИ ПОЛОЖЕНИЯ О ЛИЦЕНЗИРОВАНИИ МЕДИЦИНСКОЙ ДЕЯТЕЛЬНОСТИ»,ФЕДЕРАЛЬНЫМ ЗАКОНОМ №99-ФЗ ОТ 04.05.2011Г. «О ЛИЦЕНЗИРОВАНИИ ОТДЕЛЬНЫХ ВИДОВ ДЕЯТЕЛЬНОСТИ» и Приказа ОТ 12 МАЯ 2010Г. №346Н»Об утверждении порядка организации судебно-медицинских экспертиз» Лицензии , Отзывы. Полезные статьи

Наша лаборатория была лицензирована в 2006 году.

Перечень молекулярно-генетических экспертиз, выполняемых в судебно-медицинской лаборатории ООО «МЭО Дельта»:

  • 1. Установление биологического отцовства и (или) материнства в отношении одного или нескольких детей;
  • 2. Установления биологического родства (внуки, бабушки, дедушки);
  • 3. Составление генетического паспорта человека.
  • 4. Идентификация личности по биологическим объектам: кровь, слюна (буккальный эпителий), пот, сперма, зубы, кости и их фрагменты, мышцы с целью установления идентичности имеющихся биологических объектов на одежде, стекле, обуви, головного убора, платке, белье с кровью, потом, слюной конкретного человека. Э ти экспертизы выполняются по образцам крови из пальца или буккального эпителия (слюны), которые можно сдать непосредственно в нашей молекулярно-генетической лаборатории( Контакты ) или прислать нам по почте вместе с определением о назначении экспертизы по адресу, указанному на сайте и в приложении к Лицензии — место осуществления деятельности лаборатории: г. Курск, ул. Ломоносова, д. 3-Б. Мы гарантируем конфиденциальность любого обращения. Экспертные заключения выполняются с выдачей установленного законом документа, позволяющего заявителю, при необходимости, обратиться в суд с доказательством факта установления отцовства или его отрицания. Судебные экспертизы выполняются по определению суда направляются в адрес суда. Конфиденциальность судебной экспертизы определена законом.
  • 5. Судебно-медицинская экспертиза по материалам дела. Полезные статьи
    Фото судебно-медицинской лаборатории ООО «Межрегиональной экспертной организации Дельта» /г. Курск, ул. Ломоносова, д. 3-Б/

Перечень разрешаемых экспертизой вопросов.

1).Установлении отцовства (материнства)и родства: Исключается или не исключается отцовство (материнство) данного индивидуума (Ф.И.О., дата рождения) в отношении данного ребенка (Ф.И.О., дата рождения)? Если не исключается, то какова вероятность того, что полученный результат не является следствием случайного совпадения индивидуализирующих признаков не родственных лиц?

2). Идентификация личности по вещественным доказательствам: Имеются ли на представленных вещественных доказательствах биологические следы человека? Если имеются, то принадлежат они одному или нескольким индивидуумам? Если имеются, то принадлежат ли они конкретному индивидууму (Ф.И.О., дата рождения)? Экспертиза ДНК

ВАЖНО ЗНАТЬ о недопустимых доказательствах! Б о льшая часть организаций не соответствует требованиям Федерального закона №99-ФЗ от 04.05.2011г. и Приказа Минздрава РФ №346н от 12.05.2010г. о порядке производства судебно-медицинских молекулярно-генетических экспертиз, т.е. не имеют установленную законом Лицензию и являются посредниками, или же имеют лицензию с указанием «… об оказании поликлинической помощи, лабораторной диагностики, клинической лабораторной диагностики и (или) специализированной медицинской помощи по производству ……», что относится к «сестринскому делу», но не к судебно-медицинской экспертизе! Проведенная ими экспертиза ДНК будет однозначно являться недопустимым доказательством по делу и влечет за собой отмену или пересмотр решения суда, а в до судебном порядке проведенное ими исследование (или анализ ДНК или тест ДНК) не может иметь юридической силы. В следствии отсутствия у таких организаций соблюдения требований закона, они не могут гарантировать ни сам результат , ни степень ответственности!

Читайте так же:  Перерасчет кадастровой оценки

/ Библия, Книга притчей Соломоновых. 4:14-19/». Не вступай на стезю нечестивых и не ходи по пути злых; потому-что они не заснут, если не сделают зла; пропадает сон у них, если они не доведут кого до падения. Они едят хлеб беззакония и пьют вино хищения. Путь беззаконных — как тьма; они не знают обо что споткнуться..

Федеральное государственное бюджетное учреждение
Российский центр судебно-медицинской экспертизы
Минздрава России

Молекулярно-генетическая идентификация и установление родства

  • Нормативные документы
  • Виды экспертной деятельности
  • Молекулярно-генетическая идентификация и установление родства
  • Программные средства
  • Конференции, совещания, съезды

Информация о порядке проведения судебно-медицинской молекулярно-генетической экспертизы спорного происхождения детей

Для проведения экспертизы спорного происхождения детей (оспариваемого отцовства/материнства) обследуемые лица: мать, ребенок и предполагаемый отец (если не определено иное) должны явиться для сдачи крови на экспертизу — ежедневно (кроме субботы и воскресенья) с 10 до 12 часов — в лабораторию Российского центра судебно-медицинской экспертизы Минздрава России по адресу: г.Москва, ул. Поликарпова, д.12/13

Ближайшая станция метро «Беговая», выход к 1-му Хорошевскому проезду, далее пешком 10 мин до ул. Поликарпова, д.12., вход в лабораторию со стороны Бегового проезда
Схема проезда

Забор крови осуществляется при предъявлении обследуемыми лицами документов, удостоверяющих личность.

Объем забираемой крови очень мал, процедура осуществляется стерильными одноразовыми скарификаторами и не причиняет вреда здоровью. Возраст ребенка – без ограничений. Никаких специальных требований к режиму питания нет.

1). В соответствии с п. 84.4 Приказа Минздравсоцразвития России от 12.05.2010 № 346н, ст. 80 ГПК РФ особенностью производства генетической экспертизы является то, что порядок явки анализируемых лиц в лабораторию для сдачи крови (одновременно обе стороны или по отдельности), а также конкретная форма предоставления образцов крови для проведения анализа (очно или заочно — с нарочным, по почте) определяется органом, назначившим экспертизу.

2). По усмотрению органа, назначившего экспертизу, допускается изъятие биологических образцов не в том медицинском учреждении, которому поручено производство экспертизы, а в иных медицинских учреждениях (например, в Бюро судебно-медицинской экспертизы регионального уровня, поликлинике по месту жительства или работы, — в количестве 0.5 — 1 мл, и пересылка этих образцов крови в высушенном на марле виде по почте или доставка их в лабораторию нарочным. При этом образцы должны быть упакованы индивидуально, каждый — в запечатанный бумажный пакет. Упаковка должна быть снабжена идентифицирующей надписью (на основании документа, удостоверяющего личность) и подписями взявшего кровь медицинского работника и двух медицинских работников, присутствовавших при процедуре, заверенными печатью медучреждения.

3). В особых случаях (при нестандартных экспертизах по согласованию с руководителем отдела) вместо образцов крови обследуемых лиц анализу могут подвергаться и другие объекты: мазки (соскобы) со слизистой ротовой полости, выделения, высохшие следы крови и выделений, зубы, кости, волосы, абортивный материал, объекты от трупов родителей и ребенка, кости и костные фрагменты, мягкие ткани.

4). Материалы гражданского дела предоставлять необязательно.

Молекулярно-генетические методы анализа применяются для доказательной идентификации человека и установления его кровнородственных связей при судебно-экспертном исследовании вещественных доказательств биологической природы. Эти методы обеспечивают возможность выявления индивидуализирующих признаков на уровне генетической матрицы человека — клеточной ДНК. Специальная технология использования ДНК, выделенной из биологических объектов, в качестве их индивидуализирующей характеристики, получила название молекулярно-генетической индивидуализации. Эта технология (называемая также типированием ДНК, «геномной дактилоскопией») является самым современным и наиболее доказательным методом при производстве, как судебно-медицинской экспертизы идентификации личности, так и при установлении биологического родства (отцовства и материнства).

♦ Судебно-медицинские молекулярно-генетические экспертные исследования относятся к лицензируемому виду этих исследований. Право на проведение этих исследований дает «Лицензия на осуществление медицинской деятельности», в обязательном приложении к которой – в номенклатуре «разрешенных видов, методов и работ» — должно быть указано: «осуществление специализированной медицинской помощи по: судебно-медицинской экспертизе вещественных доказательств и исследования биологических объектов – генетической» (Постановление Правительства РФ от 16.04.2012 № 291). См. на сайте. Такую лицензию имеет ФГБУ «РЦСМЭ» Минздрава России»  рег. № ФС-99-01-008871 от 11.06.2014 г. (за подписью Врио руководителя Федеральной службы по надзору в сфере здравоохранения М.А.Мурашко).

♦ В Федеральном государственном бюджетном учреждении «Российский центр судебно-медицинской экспертизы» Минздрава России (ФГБУ «РЦСМЭ» Минздрава России) выполняются все виды судебных молекулярно-генетических экспертиз и исследований по всем категориям гражданских и уголовных дел, в том числе:

установление истинных родителей ребенка по делам о спорном происхождении детей (оспаривание отцовства/материнства или подмена детей).

NB ! Возможно проведение экспертизы при наличии только одного родителя или (в некоторых случаях) бабки/деда.

Возможно пренатальное исследование, позволяющее устанавливать отцовство в процессе беременности, т.е. еще до рождения ребенка.

Возможно установление отцовства в случаях, когда предполагаемый отец умер или безвестно отсутствует (Скачать) путем исследования биологических образцов от умершего  гистологического/биопсийного материала, эксгумированных останков, личных вещей,  либо путем исследования биологических образцов истинных детей или других родственников умершего;

установление родства полнородных братьев, сестер;

установление родства на уровне единокровных и двоюродных братьев, сестер, внуков, племянников и др. (Скачать)

установление родственных отношений по материнской и/или отцовской линии;

судебно-экспертная идентификация неопознанных останков;

установление принадлежности органов и биологических тканей (крови, спермы, слюны, волос) конкретному лицу;

установление половой принадлежности биологических следов;

выделение индивидуальной ДНК и хранение ее в «банке ДНК» в очищенном и законсервированном виде для целей дальнейшей идентификации с объектами преступлений и несчастных случаев;

♦ Молекулярно-генетическая экспертиза спорного происхождения детей (спорного отцовства или материнства) долж­на дать ответ на два вопроса:

А. исключается или не исключается отцовство (или материнство) данного индивидуума в отношении данного ребенка (плода);

Б. — если отцовство (или материнство) не исключается, то какова вероятность того, что это не является результатом случайного совпадения индивидуализирующих признаков неродственных лиц.

В стандартном случае при проведении экспертизы применяется сравнительный анализ особых высокополиморфных локусов хромосомной ДНК. Применение этого метода регламентируется Методическими указаниями Минздрава РФ № 98/253 «Использование индивидуализирующих систем на основе полиморфизма длины амплифицированных фрагментов (ПДАФ) ДНК в судебно-медицинской экспертизе идентификации личности и установления родства» (утверждены 19.01.1999г.).

♦ Уровень доказательности экспертизы в случае неисключения отцовства/ма­теринства должен составлять для полной группы «мать-ребенок-предполагаемый отец» не ниже 99,90% (рассчитывается как Байесова вероятность от­цовства (материнства) согласно «Инструкции по организации и производству экспертных исследований в государственных судебно-экспертных учреждениях Российской Федерации» (Приказ Минздрава РФ от 12.05.2010г. № 346н). По достижении такой расчетной величины вероятности, экспертное исследование следует считать завершенным.

♦ Производство молекулярно-генетических экспертиз в ФГБУ «РЦСМЭ» Минздрава России по гражданским делам осуществляется на платной основе — за счет финансовых средств органов, назначивших экспертизу, адвокатуры, организаций или личных средств граждан, в отношении которых проводится экспертиза.

♦ Текущая Прейскурантная цена экспертизы спорного отцовства / материнства для одного ребенка составляет 33 711 рубля. Форма оплаты: 100% предоплата (после изъятия образцов) — наличный расчет в кассе Центра или безналичная оплата перечислением, при этом необходимо заключить Договор с ФГБУ «РЦСМЭ» Минздрава России на проведение судебно-медицинской генетической экспертизы.

Срок исполнения экспертизы (в зависимости от существующей очередности) – 1 — 3 недели.

Консультации: Отдел молекулярно-генетических экспертиз — тел./факс: (495)945-0094;

Читайте так же:  4 федеральный закон об исполнительном производстве

Канцелярия (495) 945-2169; Юридический отдел — (495) 945-2169, доб. 109, 120.

© ФГБУ «РЦСМЭ» Минздрава России, 2010-2017

125284, г. Москва, ул. Поликарпова, д. 12/13

Тел.: +7 (495) 945 21-69
Тел.: +7 (495) 653 13-37
Факс: +7 (495) 945 00-97

Судебно-генетическая экспертиза

Наша команда профессионалов ответит на ваши вопросы

Центр Молекулярной Генетики проводит судебно-медицинские генетические экспертизы по определениям судов и постановлениям следственных органов на основании соответствующей лицензии на осуществление медицинской деятельности — проведении судебно генетической экспертизы вещественных доказательств и исследования биологических объектов, в том числе: генетической. Число организаций в России, имеющих такую лицензию, можно сосчитать по пальцам одной руки. Сегодня интернет наводнен предложениями по проведению генетической экспертизы. Прежде чем проводить такое исследование в определенной организации, удостоверьтесь в наличии у нее лицензии именно на вид деятельности, указанный выше. Организация должна быть сертифицирована и проводить исследования обязательно в России, а не где-то зарубежом. Помните, что суд не вынесет определение на проведение экспертизы в организации, не имеющей соответствующей лицензии, и не примет к рассмотрению заключение из такой организации. Вам придется проходить процедуру повторно и заново оплачивать экспертизу.

Цены на судебно-генетические экспертизы других степеней родства

Помните, что официально установить или опровергнуть родство (например, изменить запись об отцовстве) МОЖЕТ ТОЛЬКО СУД. И только в рамках рассматриваемого судом гражданского дела может быть проведена судебно генетическая экспертиза.

Различия между судебно генетической экспертизой и исследованием по установлению отцовства, проводимом в частном порядке, представлены в Таблице 1:

Судебно-медицинская генетическая экспертиза установления родства / отцовства

Молекулярно-генетическое исследование на предмет установления биологического родства / отцовства

Важное замечание: Рассмотренные выше два вида исследований, то есть генетическое исследование и судебно-медицинская генетическая экспертиза различаются только по формальным юридическим признакам. Методика выполнения исследований, достоверность получаемых результатов обоих случаях совпадают. Несмотря на то, что оформление экспертного заключения является весьма трудоемкой процедурой, требующей специальной квалификации, стоимость генетической экспертизы в нашем Центре такая же, как и обычного генетического исследования по установлению родства.

Давайте подытожим всё сказанное выше.

1. Если Вам нужно официальное подтверждение или исключение родства / отцовства, то Вы подаете гражданский иск в суд и уже в суде ходатайствуете о назначении по делу судебно-медицинской генетической экспертизы отцовства и просите поручить Проведениеэкспертизы ДНК ООО «Центр Молекулярной Генетики» на основании имеющейся лицензии на осуществление медицинской деятельности — проведении судебно-медицинской экспертизы вещественных доказательств и исследования биологических объектов, в том числе:генетической.

2. Если Вы пока не готовы идти в суд или желаете проверить наличие или отсутствие родства / отцовства «для себя», то мы готовы провести для Вас молекулярно-генетическое исследование в частном порядке по Вашему запросу на основании лицензии на осуществление медицинской деятельности — осуществлению специализированной медицинской помощи по: генетике, лабораторной генетике.

Молекулярно-генетическая экспертиза: как ловят маньяков

Да, речь идет о ДНК и молекулярно-генетической экспертизе. Всё вроде бы просто: берется ДНК из клеток, оставленных преступником, и сравнивается с ДНК из клеток подозреваемого. На самом деле, конечно, простота тут кажущаяся. Если некоторые живые клетки можно разглядеть в слабенький школьный микроскоп, а то и невооруженным глазом (пример — яйцо), то ДНК — объект микромира, и так просто «взять» ее не получится. То же со «сравнением». ДНК человека составляют 3,1 млрд пар оснований. Прочтение (секвенирование) всего этого объема информации — задача крайне трудоемкая.

Сколько надо клеток?

О том, как составляется уникальный генетический портрет человека и какие технологии при этом применяются, мы поговорили с представителями компании Gordiz — единственного в России производителя реагентов для проведения генетических судебно-медицинских экспертиз. Для начала хотелось узнать, какой минимум биологического материала должен оставить преступник на месте преступления, чтобы молекулярно-генетический анализ стал возможен.

Схема полимеразной цепной реакции показывает основные этапы многократного копирования интересующего участка ДНК (маркера). На этапе денатурации под воздействием нагрева цепочка ДНК распадается на две нити. На этапе отжига при охлаждении к отдельным нитям ДНК присоединяются метки-праймеры. На этапе элонгации фермент полимераза достраивает вторую нить исследуемому участку.

«Можно в принципе получить результат из одной клетки, — говорит специалист компании Сергей Леонов, врач-биохимик, несколько лет проработавший судмедэкспертом. — Есть, например, приборы — лазерные микродиссекторы, которые позволяют вырезать из исследуемых образцов единичные клетки. Однако работа с таким малым количеством генетического материала не относится к стандартным технологиям и процессам и не гарантирует высокую надежность. Для нормального процесса нужно как минимум 10−15 клеток, и на самом деле это очень маленькое количество. Одно прикосновение рукой к предмету оставляет на нем сотни клеток».

Да, человек щедро разбрасывается генетическим материалом, но уже на этапе поиска биологических следов преступника судмедэкспертов поджидает много проблем. Например, отличный материал для исследования — кровь, следы которой хорошо заметны и в них обычно много ДНК. Но в пятне крови могли смешаться кровь преступника и жертвы. Как отделить клетки друг от друга? Задача несколько упрощается, если преступник и жертва разнополы: тогда возможна предварительная сортировка по наличию или отсутствию Y-хромосомы. Вообще работа со смешанными объектами — это часто встречающаяся ситуация: как правило, предметы, к которым прикасался злоумышленник, трогал кто-то и до него, и там можно найти биоматериал, принадлежащий десяткам людей. Для выделения нужного материала порой используют количественный метод: след преступника самый свежий, а значит, если количество каких-то клеток на поверхности объекта хотя бы на порядок превышает число остальных, можно предположить, что это и есть искомый биоматериал.

Типичный случай: после изнасилования эпителиальные клетки жертвы смешаны со сперматозоидами преступника. Для этого случая создан специальный метод. Поскольку эпителий имеет меньшую структурную прочность по сравнению с мужскими половыми клетками, его можно разрушить специальными химикатами, оставив сперматозоиды невредимыми и получив чистую фракцию клеток насильника.

Таким образом, собственно молекулярно-генетическому исследованию предшествует поиск необходимого материала и выделение его из разных смесей. Существуют, например, химические методы поиска следов крови там, где эти следы пытались отмыть. Есть технологии поиска клеток, оставленных на бумаге и других материалах.

Другой вопрос — сохранность биоматериала. С одной стороны, прочитан геном неандертальца и мамонта, то есть ДНК может сохраняться десятки тысяч лет. А с другой — в пятне крови, оставленном преступником пару дней назад, ДНК может не оказаться вовсе. Как же так? «ДНК — это одна из самых устойчивых биомолекул, — объясняет Сергей Леонов. — Если есть условия для хранения, она может оставаться в целости почти неограниченное количество времени. Лучшие условия — это высушивание, например на бумаге. Лично мне приходилось участвовать в работах по идентификации останков солдат, погибших во время Великой Отечественной. ДНК, обнаруженные в останках, сравнивались с сохранившимися образцами ДНК с фронтовых писем, которые предоставляли родственники погибших в этих местах воинов».

ДНК быстро разрушается под воздействием разных биологических, химических и физических факторов. Если биоматериал попадает во влажную среду, тут же начинается гниение. Гниение — это не что иное, как поедание клеток бактериями. Бактерии к тому же выделяют особые вещества — нуклеазы, которые разрушают весь находящийся поблизости генный материал: это оружие борьбы с вирусами. Если платок с пятном крови стал объектом гнилостных процессов, может оказаться, что пятно крови есть, а ДНК в нем уже нет. Наличие и концентрация в образцах генного материала будут выявлены химическими методами в ходе химического анализа, однако до того, как это произойдет, необходимо экстрагировать ДНК из клеточной среды. «Для этого, — говорит Сергей Леонов, — применяются специальные реагенты, которые полностью разрушают материал клетки, оставляя лишь ДНК. Затем ДНК электростатически связывается с сорбентом, который извлекается, а затем смывается водой. Так получается чистый водный раствор ДНК». Если согласно дальнейшему анализу генный материал есть в растворе и в требуемом количестве, можно приступать к созданию генетического «отпечатка».

На схеме показана классическая схема генетического анализа с использованием агарозного геля. Маркеры двигаются под воздействием электрического поля в блоке геля. Поскольку маркеры меньшего размера встречают меньшее сопротивление геля, они вырываются вперед. Окончательная идентификация маркеров происходит с помощью лазерной подсветки, возбуждающей флюоресценцию.

Польза от молчания

Первым делом следует заметить, что сравнивать полностью две ДНК никакой нужды нет. Генетически все люди на Земле идентичны на 99,99%, и потому есть смысл анализировать лишь сходство-различие определенных участков генома, которые обладают полиморфизмом, то есть представлены у разных людей в нескольких разных видах. «Золотым стандартом» на сегодняшний день считается исследование полиморфных маркеров, имеющих переменную длину. Маркеры — это участки «молчащей» ДНК, которые не выступают в качестве действующих генов и не кодируют белки. Зато они имеют характерную структуру — одни и те же последовательности пар оснований повторяются в них несколько раз. Разное число повторов и формирует тот самый полиморфизм. Разумеется, число вариантов длины одного маркера не равно числу людей на Земле. Если у маркера есть (условно) десять вариантов, то обладание маркером определенной длины означает лишь принадлежность к одной из десяти групп человечества, численностью в сотни миллионов человек каждая. Но если мы добавим сюда данные по второму полиморфному маркеру, группа, где встречается такое сочетание длин, заметно сузится. Речь пойдет уже о миллионах человек. При добавлении новых маркеров будет, как говорят в науке, экспоненциально нарастать дискриминационный потенциал, и наконец, число маркеров можно довести до такого количества, когда сочетание данных по их длинам станет уникальным для отдельной личности, а вероятность повтора этого «рисунка» практически сведется к нулю. Ключ к идентификации личности — всего-то дюжина полиморфных маркеров. Но тут мы вспомним, что ДНК — объект микромира, и ни линейкой, ни штангенциркулем ее участки померить невозможно. Здесь на помощь приходит биохимия и электричество.

Читайте так же:  Приказ фас от 17042008

Конструктивный бульон

Молекулы, даже такие сложные, как цепочки ДНК, настолько малы, что для молекулярно-генетического исследования требуется не одна копия интересующего нас участка генома (маркер), и не десять, и не сто, а миллионы и миллиарды. Требуется, таким образом, значительная концентрация копий маркеров, которая сделает возможным физическую индикацию параметров. Ядро, самый сложный момент всей технологии идентификации личности — полимеразная цепная реакция (ПЦР), которая как раз и позволяет накопировать маркеров столько, сколько нужно. Реакция происходит в растворе, где присутствуют исследуемые ДНК, своеобразные метки-праймеры (фактически конструктивно идентичные небольшим участкам одной нити ДНК), находящиеся в «свободном плавании» формирующие ДНК азотистые основания — аденин (A), гуанин (G), цитозин ©, тимин (T), катализаторы и, наконец, главный действующий персонаж — фермент Taq-полимераза. Реакция происходит при переменных температурных режимах. Сначала с помощью нагрева ДНК денатурируется, то есть ее «двойная спираль» распадается на две нити, а пары оснований размыкаются. Затем при охлаждении праймеры отмечают границы интересующего нас маркера. Они примыкают к нитям ДНК, на небольшом участке как бы восстанавливая двойную структуру молекулы. После этого полимераза «берет» из раствора азотистые основания и, работая по одну сторону маркера, достраивает вторую нить для каждой из нитей денатурированной ДНК. В итоге вместо одной ДНК в растворе появляются две молекулы с частично восстановленной двойной структурой (в частности, для маркера). Затем все повторяется: денатурация с разделением двух нитей, праймеры и работа полимеразы. В результате цепной реакции мы получаем огромное количество копий имеющего нормальную двойную структуру маркера.

«ПЦР — очень сложный и дорогостоящий процесс, — говорит гендиректор компании Gordiz Владимир Орехов. — Количество компаний в мире, которые выпускают реагенты для такой реакции, можно посчитать на пальцах одной руки, и одна из них — наша — находится в России. Главная сложность в том, что в пробирке одновременно должны копироваться все маркеры и при этом не мешать друг другу. Сколько нужно маркеров? Американский стандарт CODIS включает в себя 13, европейский ESS — 12. Хотя маркеры из двух систем пересекаются, есть и отличия. Чтобы удовлетворить нужды специалистов, работающих в рамках разных стандартов, мы выпускаем реагенты для ПЦР с участием 19 маркеров. Такого количества хватит для идентификации уникальной личности, даже если население Земли вырастет на несколько порядков. Есть у нас и свое ноу-хау. Дело в том, что обычно реагенты для ПЦР выпускаются в жидком виде, что предъявляет особые требования к условиям хранения и транспортировки (в частности, нужна заморозка). Мы производим реагенты методом высушивания сырых смесей, и никаких особых условий для транспортировки им не нужно. Все это удешевляет процесс и упрощает задачу доставки реагентов, например, в отдаленные районы. Отмечу, что все сырье для реагентов отечественного производства».

Генетический анализатор — это аппарат, представляющий более продвинутую технологию сортировки выделенных из ДНК маркеров. Здесь маркеры двигаются в капиллярах из пористого полимера. На фото представлен прибор «НАНОФОР-05», выпущенный российской компанией «Синтол».

Продукт ПЦР — раствор с высокой концентрацией маркеров — это уже готовая база для проведения замеров. Методики могут несколько отличаться, но в основе их лежит процесс, знакомый многим, кто посещал кабинеты физиотерапии в поликлиниках. Это электрофорез — движение заряженных молекул в электрическом поле.

«До сих пор в России пользуются методом разделения продукта ПЦР на полиакриламидном геле, — рассказывает Сергей Леонов. — На смену этому методу, который берет начало с 1980-х, пришли генетические анализаторы. В них движение молекул происходит внутри капилляров из пористого полимера. Но суть одна: маркер, являясь катионом, при приложении электрического поля начинает двигаться, однако из-за сопротивления среды более длинная молекула тормозит, а короткая передвигается быстрее».

Таким образом, молекулы сепарируются по длине. Правда, некоторые маркеры могут иметь одинаковую длину (одинаковое число пар оснований), различаясь при этом по структуре размещения оснований. Чтобы избежать путаницы, потенциально схожие по размерам маркеры еще в процессе ПЦР получают флюоресцентную метку (одного из четырех или пяти цветов). В генетическом анализаторе маркеры подсвечиваются лазером, луч которого возбуждает свечение определенного цвета. После этого маркер может считаться окончательно идентифицированным. Итоговый документ анализатора — таблица, в которой цветом отмечено наличие в геноме тех или иных вариантов (аллелей) всех исследуемых маркеров. И это все?

«Нет, не все, — говорит Владимир Орехов. — Если совпадают образцы следа и живой ткани, возникает вопрос статистики — насколько вероятно совпадение. Теоретически вероятность существует, и по итогам молекулярно-генетических исследований вероятность 100% не выдается. Другое дело, что вероятность точной идентификации составляет 99% плюс много цифр после запятой. Но чтобы заключение имело все признаки научности, эту вероятность надо посчитать математически с учетом, например, популяционных частот для каждого признака (распространенный признак — больше вероятность совпадения, редкий — меньше). В связи с этим существует миф о том, что какие-то виды криминалистических экспертиз дают однозначный ответ «да» или «нет», а генетическая экспертиза дает лишь количественную оценку вероятности. Но на самом деле самый точный ответ дает именно генетика, а, например, почерковедение или дактилоскопия могут ошибаться, и такие случаи известны. Конечно, в генетическую экспертизу может вмешаться человеческий фактор (лаборант перепутал образец и т. п. ), но если исследование проведено правильно, оно дает строго научный и точный результат».

С течением времени молекулярно-генетическая экспертиза становится все более распространенным и все менее дорогим методом криминалистики. При этом эффективность ее крайне высока. С 1990-х годов в США, Германии, Великобритании действуют законы о геномной регистрации. Согласно этим нормативным актам исследуется и заносится в базу данных биологический материал, оставленный на месте преступления не установленными лицами. В эту же базу заносится генный «паспорт» людей, отбывающих наказание за особо тяжкие преступления. Такая база оказалась весьма эффективным средством раскрытия преступлений, в которых нет ни подозреваемых, ни свидетелей, так как в большом количестве случаев неопознанный генетический материал рано или поздно находил посредством базы своего хозяина или показывал связь с другими совершенными преступлениями. Такой закон принят в 2009 году и в России, однако финансирование его началось лишь недавно, и говорить о серьезном эффекте для нашей страны пока преждевременно.